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廠家淺談富馬酸檢測方法

更新時間:2020-04-14 15:18???點擊數: 次 來源:www.ionch.com/

    廠家淺談富馬酸檢測方法
    1、富馬酸的理化性質:
    1.1、分子式C4HO4又名反丁烯二酸,分子量116.1
    結構式HOOC-CH
               =
               HC--COOH
    1.2、解離常數
    PK1=3.02,PK2=4.38.
    富馬酸二鈉(溶解度20%)
    富馬酸二銨(溶解度40%)pH3.70
    富馬酸一鈉(溶解度10.7%)
    富馬酸一銨(溶解度20%)pH2.7
    1.3、水中溶解度
    20℃,25℃,40℃,60℃,100℃
    0.5%,0.7%,1.05%,2.04%,8.93%
    酒精中溶解度:
    30℃ 5.75%,75℃ 4.76%。
    2、成品分析:
    試樣1g,移入250m三角瓶中,加甲醇50ml,水浴中加熱至溶解,冷卻后加酚酞試劑數滴,用0.5mol/LNaOH溶液滴定至淺紅色,持續30秒以上。每ml0.5mol/LNaOH-29.02mg富馬酸。
    3、中間產品分析
    3.1、氧化法:用0.02mol/LKMnO4標準溶液滴定,取樣品含富馬酸(1~10mg)于50ml三角瓶中,加蒸餾水2ml,濃H2SO4滴,用0.02ml/LKMnO4,每3秒1滴,過量1滴,赤色不退為終點。
    3.3.1、原理:富馬酸在pH≥8.5條件下,經1-天門冬氨酸酯反應與氨合成天門冬氨酸,再由天門冬氨酸脫羧酶在p≤6條件下,脫去CO2,專一性生成丙氨酸,用華勃呼吸儀測定釋放出CO2微升數,計算天門冬氨酸含量再換算成富馬酸含量。
    3.3.2測定:華勃呼吸儀:主室天門冬氨酸脫羧酶(德昆氏假單孢菌IAM52)丙酮干粉3%酶液0.5ml,0.2molL醋酸緩沖液(pH5.0)0.5ml,蒸餾水lrml,側室樣品0.5ml(含天門冬氨酸0.6~1.6mg)于37℃反應2030min,并做對照(側室以蒸餾水代)記下釋放出CO2徵升數。
    4、中間產品的分壢方法訶論:
    4.1、氧化法:所有具還原性性質均有干擾,如葡萄糖及其它還原糖,羥基酸中乳酸可氧化成2-羥基丙酸,蘋果酸可氧化成草酰。
    乙酸,檸檬酸被KMnO4氧化成3-酮戊二酸。
    4.2、紫外分光法:具有紫外吸收性質的化合物在不同波長均有干擾,如肉桂酸在278m處有最大吸收值,蘋果酸在385mm處有最大吸收值,酪氨酸色氨酸在240nm處有較大吸收值,谷氨酸在213mm處有最大吸收值。
    4.3、酶法:專一性較強。
    4.3.1、天門冬氨酸的菌種系大腸桿菌,培養基為肉湯諳莽基,除天門冬氨酸酶外,一般還有富馬酸,將富馬酸轉化成蘋果酸。
    4.3.2、天門冬氨酸脫羧酶以脫羧酸為主,但含有少量富馬酸酶及丙氨酸消旋酶。
    4.3.3、大腸桿菌及德昆氏假單孢菌,經優化處理即調pH及加熱可大幅度減少其它酶活力。

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